Medical Sciences Journal of Islamic Azad University

fa پتانسیل تمایز شبه عصبی حرکتی سلول های بنیادی خون سازCD133+ و CD34+ مشتق از خون بند ناف انسان؛ در شرایط آزمایشگاه Differentiation potential of human CD133 and CD34 positive hematopoietic stem cells into motor neuron- like cells; an in vitro study زیست شناسی Biology تجربي Experimental سابقه و هدف: در این مطالعه، تمایز سلول های بنیادی خون ساز CD133+ و CD34+ مشتق از خون بند ناف انسان، به سلولهای شبه عصبی حرکتی، بررسی شد. روش بررسی: سلولهای بنیادی خون ساز از خون بند ناف انسان جدا شده و سپس، سلولهای CD133+ و CD34+ براساس  مارکر، توسط تکنیک  جداسازی مغناطیسی MACS  تفکیک شدند. بررسی فلوسایتومتری، برای  تعیین درصد خلوص سلول های جداشده، انجام گرفت. پس از آن، سلولها در محیط کشت دارای سرم و حاوی فاکتورهای RA، Shh، BDNF و B27 کشت داده شدند و در انتها بیان پروتئینهای عصبی حرکتی AChE، ISL-1، NF-H و Nestin توسط ایمونوسیتوشیمی و فلوسایتومتری بررسی شد. یافتهها: آنالیز فلوسایتومتری مارکر های سطحی  نشان دهنده 98درصد سلول های CD133+ و 7/95 درصد سلول های CD34+ جداشده بود. تغییر شکل سلولها، به صورت ایجاد زوائد آکسون مانند، پس از دوره تمایزی و بیان پروتئینهای عصبی حرکتی با ایمونوسیتوشیمی مشاهده شد و نتایج حاصل از فلوسایتومتری پس از دوره تمایزی بیان ) ISL-14/66%)، AChE (3/58%)، NF-H (6/80%)، Nestin (9/84%) را در سلولهای CD133+ و همچنین بیان  ISL-1(2/63%)، AChE (3/52%)، NF-H (6/78%) و Nestin (1/80%) را در سلولهای CD34+ تایید کرد. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که سلولهای بنیادی خون ساز CD133+ و CD34+ خون بند ناف انسان قابلیت تمایز به سلولهای شبه عصبی حرکتی را در شرایط آزمایشگاه دارند والبته مطالعات بیشتر جهت بررسی عملکرد سلول های شبه عصبی حرکتی حاصل از این تمایز در بدن موجود زنده پیشنهاد میشود. Background: We were studied on differentiation potential of CD133+ and CD34+ hematopoietic stem cells into motor neuron like cells. Materials and methods: CD133+ and CD34+ HSCs were isolated from human UCB using MACS system. After cell characterization using flow cytometry, the cells were treated with a combination of Retinoic acid, Sonic hedgehog, Brain derived neurotrophic factor, and B27 through a 2- step procedure for two weeks. The expression of MN-specific markers was examined using immunocytochemistry and flow cytometery. Results: Flow cytometery analysis revealed 98% and 95.7% CD133+ and CD34+ cells, respectively. By the end of the two-week differentiation protocol, CD133+ and CD34+ cells acquired unipolar MNL morphology with thin and long neurites. The expression of Isl-1, AChE, NF-H and Nestin was detected in 66.4%, 58.3%, 80.6%and 84.9% of CD133+ cells and 63.2%, 52.3%, 78.6% and 80.1% of CD34+ cells. T Conclusion: Human UCB - CD133+ and CD34+HSCs are remarkably potent cell candidates to trans- differentiate into motor neuron-like cells, in vitro. خون بند ناف, سلول بنیادی خون‌ساز, سلول عصبی حرکتی, تمایز CD133+, CD34+, Hematopoietic Stem Cell, Motor Neuron, Umbilical Cord Blood 92 103 http://tmuj.iautmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-531&slc_lang=fa&sid=1 Sepideh Alavi Moghaddam سپیده علوی مقدم 10031947532846007247 10031947532846007247 No Cellular and Molecular Biology, Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran سلولی و مولکولی، گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران، تهران ، ایران Faezeh Faghihi فائزه فقیهی faezefaghihi@yahoo.com 10031947532846007248 10031947532846007248 Yes Cellular and Molecular Research Center, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran. مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی دانشگاه علوم پزشکی ایران، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران Nasim Hayati Roodbari نسیم حیاتی رودباری 10031947532846007249 10031947532846007249 No Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران ، تهران ، ایران