1- دانشگاه آزاداسلامی واحد علوم و تحقیقات ، hosseinbasiri@yahoo.com 2- دانشگاه شاهد 3- دانشگاه آزاداسلامی واحد علوم و تحقیقات 4- دانشگاه آزاداسلامی واحد علوم وتحقیقات
چکیده: (25840 مشاهده)
سابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری (H.pylori) نوعی باکتری گرم منفی اسپیرال و میکروآیروفیل است که در لایه مخاطی معده انسان تکثیر و ایجاد عفونت می نماید. رویکردهای جدید در جهت بکارگیری درمان های اختصاصی نظیر ایمنوتراپی برای ریشه کنی این عفونت میباشند. آنزیم اوره آز یکی از مهمترین عوامل بیماری زا و آنتی ژنیک این باکتری است. روش بررسی: دراین مطالعه تجربی، ابتدا بخش انتهای کربوکسیل زیر واحد C اوره آز، پس از تخلیص ژنوم باکتری، با کمک واکنش زنجیره پلیمراز (PCR) تکثیر شده و محصول روی ناقل بیانی pET28a کلون شد. پروتئین نوترکیب پس از تراریخت سازه نوترکیب به باکتری E.coli سوش Bl21DE3 بیان شد و نتایج با استفاده از SDS-PAGE تحلیل و پروتئین نوترکیب از طریق کروماتوگرافی میل ترکیبی با کمک ستون Ni-NTA تخلیص شد. پروتئین نوترکیب تخلیص شده، به مرغ لگهورن سفید تزریق و IgY با روش استون/کلروفرم تخلیص و با روش ELISA و SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: با تعیین توالی سازه نوترکیب، صحت انجام همسانه سازی تأیید شد. بررسی با SDS-PAGE نشان داد پروتئین نوترکیب rUreCc به خوبی بیان و تخلیص شده است. همچنین نتایج الایزا ایمن‌زایی بالای این پروتئین نوترکیب را نشان داد.
نتیجه‌گیری: تولید پروتئین نوترکیب rUreCc هلیکوباکتر پیلوری در E.coli به عنوان سلول میزبان، امکان دسترسی آسان به آنتی-ژن را فراهم کرد. علیرغم کوچک بودن آنتی‌ژن نوترکیب، توانایی ایمنی زایی آن شبیه به کل زیر واحد C اوره آز است
Basiri H, Mousavi Gargari S L, Rasuli I, parivar K, Nejad Satari T. Cloning, expression and purification of C-terminal of Helicobacter pylori urease enzyme C subunit for production IgY in chicken egg yolk. MEDICAL SCIENCES 2012; 22 (1) :23-31 URL: http://tmuj.iautmu.ac.ir/article-1-537-fa.html
بصیری حسین، موسوی گرگری سیدلطیف، رسولی ایرج، پریور کاظم، نژادستاری طاهر. همسانه‌سازی، بیان و تخلیص انتهای کربوکسیل زیرواحد C آنزیم اوره‌آز هلیکوباکتر پیلوری به منظور تولیدIgY در زرده تخم مرغ. فصلنامه علوم پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی تهران. 1391; 22 (1) :23-31
