fa بقا و تکثیر جزایر جدا شده پانکراسی موش بالغ در شرایط کشت آزمایشگاهی زيست شناسي جانوري Animal Biology تجربي Experimental <p dir="RTL"><strong>سابقه و هدف</strong><em>:</em> <em>پیشرفت&shy;های اخیر در تمایز مستقیم سلول&shy;های بنیادی پانکراسی، پیشنهاد دهنده پتانسیل جایگزینی پانکراس در بیماران دیابتی است، اما اغلب پروتوکل&shy;های موجود پیچیده، زمان&shy;بر و پرهزینه است؛ بنابراین باید به دنبال پرتوکل&shy;های دیگری بود. امروزه استفاده از کشت هم&shy;زمان با جزایر پانکراسی، روشی امیدبخش برای تولید سلول&shy;های بتا است؛ بنابراین نیازمند نگهداری جزایر زنده برای دوره زمانی گسترده هستیم</em><em>.</em></p> <p dir="RTL"><strong>روش بررسی</strong><em>:</em> <em>جزایر پانکراسی جدا شده از موش به مدت 2 هفته در شرایط کشت آزمایشگاهی نگهداری و بقا، تکثیر و مورفولوژی آنها مورد بررسی قرار گرفت. جزایر پانکراسی از موش نر نژاد </em><em><span dir="LTR">NMRI</span></em><em> با روش تعدیل شده </em><em><span dir="LTR">Lacy and Kostianovsky </span></em><em>&nbsp;و هضم آنزیمی با کلاژناز جدا شدند و برای تعیین ویژگی&shy;ها، به وسیله رنگ دیتیزون رنگ آمیزی شدند. همچنین بقای جزایر با روش </em><em><span dir="LTR">MTT</span></em><em> بررسی شد</em><em>. </em></p> <p dir="RTL"><strong>یافته&shy; ها:</strong> <em>نتایج&nbsp; ما نشان داد که می&shy;توان جزایر پانکراسی موش بالغ را جدا کرده و حداقل به مدت یک هفته کشت داد، بدون اینکه عملکرد فعال خود را از دست دهند. با گذشت یک هفته، با توجه به کاهش بقا سلولی، تعداد سلول&shy;های جزایر نیز کاهش پیدا کرد. هر چه مدت زمان کشت افزایش پیدا می&shy;کرد، از میزان بقا و تعداد سلولها کاسته می&shy;شد</em><em>. </em></p> <p dir="RTL"><strong>نتیجه</strong>&shy;<strong>گیری</strong><em>:</em> <em>می توان جزایر جدا شده را به صورت زنده و فعال در کشت هم</em><em>&shy;زمان مورد استفاده قرار داد. از آنجایی که این جزایر در سلول درمانی در جهت درمان دیابت استفاده می&shy;شود، بررسی میزان بقای این سلول&shy;ها در شرایط محیط کشت ضروری به نظر می&shy;رسد</em><em>.</em></p> <p dir="RTL"><strong>واژگان کلیدی:</strong> <em>بقا، تکثیر، جزایر پانکراسی، کشت سلول، </em><em><span dir="LTR">MTT</span></em><em>، </em><em><span dir="LTR">NMRI</span></em><em>.</em></p> <p><strong>Background</strong>: Recent advances in directed differentiation of pancreatic stem cells offers potential to the development of replacement therapy for diabetic patients. However, the existing differentiation protocols are complex, time-consuming, and costly; thus there is a need for alternative protocols. Today, co-culturing with pancreatic islets is apparently a promising protocol for producing beta cells. Furthermore, we need keep islets viable in vitro for extended time periods.</p> <p><strong>Materials and methods</strong>: We maintained isolated pancreatic islets obtained from the mouse pancreas in tissue culture for 2 weeks, after which we studied the viability, proliferation and morphology of the islets. Pancreatic islets were isolated from overnight-fasted male NMRI mice by Lacy and Kostianovsky modified collagenase digestion method and islets were tested for their specificity by dithizone (DTZ) staining. Also, islet cell viability was tested by MTT assay.</p> <p><strong>Results</strong>: Our results showed that viable pancreatic islets can be isolated from the pancreas of adult mice and maintained in tissue culture for at least 1 week, without loss of the specific functions of the cells. Cell viability of pancreatic islets was decreased after one week and also, the cell number decreased over time.&nbsp; Cell viability and cell number were decrease if cells were incubated for long time.</p> <p><strong>Conclusion</strong>: It remains to be established whether such islets will survive and remain functionally competent after co culturing. Survey of viability of pancreatic islets is necessary in in vitro, because these were used for cell therapy for diabetes.</p> <p></p> <p><strong>Keywords</strong>: <em>Survival, Proliferation, Pancreatic islets, Culture, MTT, NMRI.</em></p> بقا, تکثیر, جزایر پانکراسی, کشت سلول, MTT, NMRI. Survival, Proliferation, Pancreatic islets, Culture, MTT, NMRI. 69 75 http://tmuj.iautmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-446&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Nabiouni محمد نبیونی 10031947532846005634 10031947532846005634 No Department of Cellular and Molecular, Faculty of Biological Sciences, Kharazmi University, Tehran, Iran گروه سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی تهران Elham Havizi الهام حویزی 10031947532846005635 10031947532846005635 No Department of Biology, Faculty of Sciences, Shahid Chamran University, Ahvaz, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه شهید چمران اهواز Azar Chavoshian آذر چاوشیان 10031947532846005636 10031947532846005636 No MSC in Cellular and Molecular Biology, Faculty of Biological Sciences, Kharazmi University, Tehran, Iran کارشناسی ارشد زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی تهران Somayeh Bahramzadeh سمیه بهرام زاده 10031947532846005637 10031947532846005637 No Department of Cellular and Molecular Biology, Developmental Cellular Biology, Jondi-Shapoor University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، زیست شناسی سلولی تکوینی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز Mahmood Hashemitabar محمود هاشمی تبار Hashemi _ tabar @ Hotmail.com 10031947532846005638 10031947532846005638 Yes Cellular and Molecular Research Center, Jondi-Shapoor University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز