Medical Sciences Journal of Islamic Azad University

fa بررسی تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی جدا شده از کوریون انسان به سلول‌های شبه میوبلاست Evaluating the differentiation potential of human chorion-derived mesenchymal stem cells into myoblast-like cells زيست شناسي مولكولي Molecular Biology تجربي Experimental سابقه و هدف:به منظور بازیابی سلول های از دست رفته بیماران مبتلا به بیماری های مخرب ماهیچه، سلول درمانی اخیرا به عنوان یک رویکرد موثر ثابت شده است. کوریون یک منبع اخلاقی مورد تایید، شامل سلولهای بنیادی مزانشیمی با توانایی خود تجدید پذیر و تمایز به رده های سلولی است. از این رو هدف از این مطالعه بررسی تمایز میوژنیک سلولهای بنیادی مزانشیمی جداشده از کوریون انسان برای اولین بار بود. روش بررسی: سلولهای کوریون با استفاده از کلاژناز II 3/0% هضم آزیمی شدند. سلولها با استفاده از تکنیک فلوسایتومتری و تمایز به ردههای سلولی چربی و استخوان شناسایی شدند. به منظور القای میوژنیک، سلولها به مدت یک شبانه روز در محیط کشت حاوی DMEM F/12، 2درصد FBS و 10 میکرومولار 5-آزاسیتیدین کشت داده شدند. سپس محیط کشت حاوی DMEM F/12، 10درصد FBS به مدت دو هفته جایگزین شد. Real-time PCR و ایمونوسیتوشیمی برای بررسی بیان مارکرهای میوژنیک استفاده شدند. یافتهها: بیان آنتی ژن های  CD90,CD73,CD44و توانایی تمایز به ردههای سلولی استخوان و چربی تایید شد. اگرچه کاهش بیان CTNT, MYH6 در هفته دوم مشاهده شد، اما نتایج Real-time PCR بیان بالای DESMIN, CTNT, MYH6 در پایان هفته اول را تایید کرد (05/0>p). بیان GATA4,MYOD در پایان هفته اول و دوم تمایز مشاهده شد. نتایج ایمونوسیتوشیمی بیان  Desmin،  cTnT,αMHCرا تایید کرد. نتیجهگیری: نتایج نشان داد که سلولهای مذکور، قادر به تمایز به میوبلاست هستند. واژگان کلیدی: سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از کوریون انسان، 5 -آزاسیتیدین، تمایز به میوبلاست. Background: To restore the lost cells of patients diagnosed with Muscular Degenerative diseases, stem cell therapy has recently proved to be an effective strategy. Chorion is an ethically approved reservoir which contains mesenchymal stem cells with self- renewal properties and multilineage differentiation capacity. Therefore, the aim of this study was to evaluate the myogenic differentiation potential of human chorion-derived mesenchymal stem cells (C-MSCs) for the first time. Materials and methods: Chorion was digested by using 0.3% Collagenase type II. Cells were characterized by using flowcytometry and differentiated into osteoblast and adipoblast lineages. To induce myogenic differentiation, C-MSCs were cultured in DMEM/F12 and 2% FBS supplemented with 10μM of 5-azacytidine overnight. Afterwards, the medium was replaced with DMEM/F12 supplemented with 10% FBS for two weeks. Real-time PCR and immunocytochemistry were used to evaluate the expression of myogenic markers. Results: The expression of CD90, CD73 and CD44 antigen and their ability to differentiation into osteoblast and adipoblast lineages were confirmed. Although the expression of CTNT and MYH6 reduced second week, Real-time PCR results revealed significant upregulation of Desmin, MYH6 and Cardiac TroponinT at the end of the first week (P<0.05). Slight upregulation of MYOD and GATA-4 transcripts at first and second week were observed. ICC staining approved the expression of Desmin, cTnT and α-MHC.   Conclusion: The results showed that C-MSCs were potent to differentiate into myoblast- like cells.   Keywords: Human chorion, Mesenchymal stem cells, 5-azacytidine, Myogenic differentiation. <div></div> سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از کوریون انسان, 5 -آزاسیتیدین, تمایز به میوبلاست Human chorion, Mesenchymal stem cells, 5-azacytidine, Myogenic differentiation. 195 206 http://tmuj.iautmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-542&slc_lang=fa&sid=1 Nikoo Bana نیکو بنا 10031947532846007331 10031947532846007331 No کارشناس ارشد سلولی و مولکولی، گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران، تهران، ایران Faezeh Faghihi فائزه فقیهی Faghihi.f@iums.ac.ir 10031947532846007332 10031947532846007332 Yes Cellular and Molecular Research Center, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی دانشگاه علوم پزشکی ایران، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران Mansooreh soleimani منصوره سلیمانی 10031947532846007333 10031947532846007333 No School of Medicine, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran دانشکده پژشکی، گروه آناتومی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران Nasim Hayati Roodbari نسیم حیاتی رودباری 10031947532846007334 10031947532846007334 No Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران ، تهران، ایران