fa بررسی ایمنی همورال و سلولی پروتئین نوترکیب اتولیزین استافیلوکوکوس اورئوس در مدل موشی ميكروبيولوژي Microbiology نيمه آزمايشي Semi-pilot <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">سابقه و هدف</span></span><em><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">:</span></span></span></em> <em><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">استافیلوکوکوس اورئوس کوکسی گرم مثبت و پاتوژن فرصت طلب است. با توجه به گسترش مقاومت این باکتری در برابر آنتی&shy;بیوتیک&shy;ها، یکی از مهم&shy;ترین راه&shy;های پیشگیری، استفاده از واکسن است. در این بین، پروتئین</span></span></span></em> <em><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">اتولیزین به عنوان یکی از مولکول&shy;های چسبندگی باکتری نقش مهمی در اتصال به سلول&shy;های میزبان و تقسیم سلولی دارد. در مطالعه حاضر نقش پروتئین اتولیزین به عنوان کاندیدای واکسن مورد بررسی قرار گرفت</span></span></span></em><em><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">. </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></em><br> <span style="letter-spacing:-.3pt;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">روش بررسی</span></span></span><em><span style="letter-spacing:-.3pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">:</span></span></span></em> <em><span style="letter-spacing:-.3pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">بعد از </span></span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تولید پروتئین نوترکیب اتولیزین، 20میکروگرم </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;R-Autolysin</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> فرموله شده با ادجوانت&shy;های آلوم و مونتاناید </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;ISA-266</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> سه بار با فواصل دو هفته&shy;ای در موش&shy;های </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;Balb/c</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">به صورت زیر جلدی تزریق شد. با استفاده از روش الایزای غیر مستقیم تیتر آنتی بادی توتال، ایزوتایپ&shy;های </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">IgG1</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">، </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">IgG2</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> و سایتوکاین&shy;های </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">IL4</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;IFN-&gamma;</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">اندازه گیری شد. موش&shy;های آزمایشی با دوز </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">cfu</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">108&times; 5 مورد چالش باکتریایی قرار گرفتند، سپس تعداد باکتری&shy;ها در&nbsp; ارگان&shy;های داخلی تعیین شد</span></span></span></em><span style="letter-spacing:-.3pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">.</span></span></span>&nbsp; <em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.3pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></em><br> <span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">یافته</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:14.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ها:</span></span></span> <em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ایزوتایپ آنتی&shy;بادی&shy;های </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;IgG1</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">و</span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">IgG2a</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در موش&shy;های واکسینه شده در مقایسه با گروه کنترل، افزایش معنی&shy;داری داشتند. همچنین سایتوکین&shy;های </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">IFN-&gamma;</span></span></em> <em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">و </span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;IL-4</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تفاوت معنی&shy;داری در گروه</span></span></span></em> <em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های مختلف واکسینه شده در مقایسه با </span></span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">گروه کنترل </span></span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نشان دادند</span></span></span></em><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">.</span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> میزان باکتری در اندام&shy;های داخلی موش&shy;های واکسینه شده 1000 بار کمتر از گروه های کنترل بود. در نهایت</span></span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> بقای</span></span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> موش&shy;های</span></span></span></em> <em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ایمن پس از چالش در مقایسه با گروه کنترل افزایش یافته بود</span></span></span></em><em><span style="letter-spacing:-.2pt;font-weight:normal;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">.</span></span></span></em><br> <strong><span dir="RTL"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجه</span></span></span></strong><span dir="RTL"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">&shy;<strong>گیری</strong><em>:</em></span></span></span> <em><span dir="RTL" style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتایج به دست آمده نشان دهنده نقش اتولیزین به عنوان کاندیدای مناسب واکسن علیه عفونت استافیلوکوکی است</span></span></span><span dir="RTL" style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">.</span></span></span></em> <strong>Background</strong>: <em>Staphylococcal aureus</em> is a gram positive cocci and opportunistic pathogen. Due to the spread of this bacterium to antibiotics resistance, one of the most important ways of prevention is the use of vaccines. In this respect, autolysin protein as one of the adhesion molecule of bacteria plays an important role for binding bacteria to the host cells and cell division. Herein<em>, </em>the role of autolysin protein was evaluated as a vaccine candidate.<br> <strong>Materials and methods</strong>: Following preparation of recombinant autolysin, Balb/c mice were injected subcutaneously with 20&micro;g of r-autolysin formulated in Montanide ISA-266 and Alum adjuvants three times with two week intervals with proper control group. Total, specific isotype antibodies, IFN-&gamma; and IL-4 cytokine were evaluated on sera by ELISA. Experimental mice were challenged with a sub-lethal dose of staphylococcus strains (1.5 &times;10⁸ CFU) and following that, the number of bacteria from internal organs were determined. Survival rate was recorded for 30 days.<br> <strong>Results</strong>: Significant increase of antibody with high level of IgG1 and IgG2a isotypes was demonstrated in vaccinated mice versus the control group. Also, IFN-&gamma; and IL-4 cytokines showed significant differences in all of the experimental vaccine groups compared to control group. The bacterial load in the internal organs from immunized mice was 1000 times less than control groups. Finally, the life span of immunized mice after bacterial challenge was extended versus control mice.<br> <strong>Conclusion</strong>: These results may indicate the capacity of autolysin as candidate vaccine to control the staphylococcus infections. استافیلوکوکوس اورئوس ,اتولیزین , واکسن , ایمنی همورال, ایمنی سلولی Autolysin, Staphylococcus aureus, Vaccine, Cellular immunity, Humoral immunity. 146 155 http://tmuj.iautmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1286-1&slc_lang=fa&sid=1 Mandana Bagherzadeh ماندانا باقرزاده mandana.bagherzade@gmail.com 10031947532846009458 10031947532846009458 No MSc Student, Department of Microbiology, Faculty of Advanced Science and Technology, Tehran Medical Sciences, Islamic Azad University, Tehran, Iran دانشجوی کارشناسی ارشد،گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم و فناوری‌های نوین، علوم پزشکی تهران، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Setareh Haghighat ستاره حقیقت setareh_haghighat@yahoo.com 10031947532846009459 10031947532846009459 Yes Assistant Professor, Department of Microbiology, Faculty of Advanced Science and Technology, Tehran Medical Sciences, Islamic Azad University, Tehran, Iran استادیار، گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم و فناوری‌های نوین، علوم پزشکی تهران، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Mehdi Mahdavi مهدی مهدوی mahdavivac@gmail.com 10031947532846009460 10031947532846009460 No Assistant Professor, Recombinant Vaccine Research Center, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran استادیار، مرکز تحقیقات واکسن، دانشگاه علوم پزشکی تهران، ایران