fa تهیه و ارزیابی فیزیکوشیمیایی وزیکول غشاء خارجی نیسریا مننژیتیدیس سروگروه Aبه عنوان کاندیدای واکسن مننگوکوکی ميكروبيولوژي Microbiology بنيادي Basic <div style="text-align: justify direction: rtl"> <span style="font-weight: bold">سابقه و هدف:</span> واکسن های پلی ساکاریدی نیسریا مننژیتیدیس سروگروهA به علت ایجاد پاسخ‌های مستقل از لنفوسیت T دارای معایبی هستند. در نتیجه پژوهش های زیادی برای جایگزین کردن آنها با اجزاء دیگر باکتری انجام شده است که می توان به وزیکول غشاء خارجی ((OMV حاوی PorA اشاره کرد. در پژوهش حاضر، پس از استخراج و ارزیابی بیولوژیکی OMV نیسریامننژیتیدیس سروگروهA ،توان القاء سنتز آنتی بادی بر علیه آن در حیوان آزمایشگاهی مورد بررسی قرار گرفت. <br><span style="font-weight: bold">روش بررسی:</span> استخراج OMV پس از کشت انبوه نیسریامننژیتیدیس سروگروه A توسط روش سیادت و همکاران انجام شد. سپس خصوصیات فیزیکو- شیمیایی OMVبا استفاده ازمیکروسکوپ الکترونی، SDS-PAGE و وسترن بلات ارزیابی شد. مقدار LOS موجود در OMV با استفاده از آزمون LAL و توان OMV درالقاء آنتی‌بادی اختصاصی با استفاده از الایزا بررسی شد.<br><span style="font-weight: bold"> یافته ها: </span>مقدارپروتئین موجود در OMV، 1/0 میلی‌گرم بر کیلوگرم اندازه گیری شد. اندازهOMV 50 تا 150 نانومتر بود و در ارزیابی SDS-PAGE محدوده PorA درناحیه kDa40-35 قرار داشت که با روش وسترن نیز تائید شد. مقدار LOS در آزمون LAL در محدوده مجاز مصرف گزارش شد. افزایش عیار معنی داری درمقدار IgG پس ازاولین تزریق مشاهده شد. <br> <span style="font-weight: bold">نتیجه گیری:</span> OMV در طی مراحل استخراج، شکل فضایی خود را حفظ نموده و توان القاء عیار بالایی از آنتی بادی های اختصاصی بر علیه نیسریا مننژیتیدیس سروگروه A را دارد. به همین دلیل می تواند پس از بررسی فازهای بالینی کاندید واکسن مننگوکوکی شود. <br><span style="font-weight: bold">واژگان کلیدی:</span> نیسریامننژیتیدیس، وزیکول غشاءخارجی ((OMV، PorA </div> <div style="text-align: justify"> <span style="font-weight: bold">Background: </span>Neisseria meningitidis serogroup A Polysaccharides vaccines have been available for many years, but these vaccines have many disadvantages due to their induction of T-Cell independent responses. To overcome these problems, many researches have been focused on other parts of bacterial cell component such as OMV (Outer membrane vesicle). In this study, OMV containing PorA were extracted and evaluated by biological and immunological methods. <br><span style="font-weight: bold">Materials and methods:</span> OMV were extracted by siadat, et al method. Physicochemical properties of extracted OMV were analyzed by electron microscopy and SDS-page. The toxicity of LPS content in OMV was assayed by LAL test. The Presence of PorA was confirmed by western blot. Antibodies synthesis after immunization by OMV was evaluated using ELISA method. <br><span style="font-weight: bold">Results</span>: The content of extracted protein was 0.1 mg/ml. Size of OMV was between 50 and 150 nanometer. SDS-PAGE showed that PorA was located in 35-40 kDa. LAL test showed that the endotoxin activity was ranged in 126EU/ml which is safe for using. The ELISA test showed that the total IgG titer was elevated after first injection.<br> <span style="font-weight: bold">Conclusion:</span> The results showed that the conformation of extracted OMV was stable, and there were no progeny determinants in OMV. Also, OMV elicited high level of specific antibodies against Neisseria meningitidis serogroup A. These results indicate that the OMV can be used as a meningococcal vaccine after further investigations.<br> <span style="font-weight: bold">Keywords</span>: Outer membrane vesicle (OMV), PorA, Neisseria meningitidis serogroup A. </div> نیسریامننژیتیدیس، وزیکول غشاءخارجی ((OMV، PorA Outer membrane vesicle (OMV), PorA, Neisseria meningitidis serogroup A. 7 13 http://tmuj.iautmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-329&slc_lang=fa&sid=1 Seyed Ali Delbaz سیدعلی دلباز d.siadat@gmail.com 10031947532846002864 10031947532846002864 No Islamic Azad University, Karaj, Iran دانشگاه آزاداسلامی واحدکرج Seyed Davar Siadat سید داور سیادت 10031947532846002865 10031947532846002865 Yes Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran انستیتوپاستورایران Mohammad Reza Aghasadeghi محمدرضا آقا صادقی 10031947532846002866 10031947532846002866 No Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran انستیتوپاستورایران Mehrangiz Zangeneh مهرانگیز زنگنه 10031947532846002867 10031947532846002867 No Islamic Azad University, Tehran, Iran دانشگاه آزاد اسلامی، واحد پزشکی تهران Seyed Mehdi sadat سیدمهدی سادات 10031947532846002868 10031947532846002868 No Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran انستیتو پاستور ایران Jalal Solati جلال صولتی 10031947532846002869 10031947532846002869 No Islamic Azad University, Karaj, Iran دانشگاه آزاد اسلامی، واحد کرج reza Ghorbani رضا قربانی 10031947532846002870 10031947532846002870 No Islamic Azad University, Tehran, Iran دانشگاه آزاد اسلامی، واحد پزشکی تهران Arfa Moshiri ارفع مشیری 10031947532846002871 10031947532846002871 No , Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران