fa بررسی ساختار ایمونوژنیسیته پروتئین نو ترکیب HIV به دست آمده از ویروس gp41-p24 اپيدميولوژي Epidemiology <p><strong>سابقه و هدف:</strong> پروتئینهای نوترکیب به دست آمده از ویروس HIV می توانند به عنوان یک ایمونوژن و تحریک کننده سیستم ایمنی باشند. از مهمترین آنها می توان به پروتئینهای داخلی (gag) و سطحی ویروس (Env) اشاره کرد. در این تحقیق به بررسی ساختار ایمونوژنیسیته پروتئین نوترکیب gp41-p24 به دست آمده از ویروس HIV می پردازیم.</p><p><strong>روش بررسی:</strong> در مطالعه تجربی حاضر، پروتئین نوترکیب gp41-p24 که قبلا توسط روشهای کلونینگ تهیه گردیده و به حالت Unfold نگهداری می شد با روشهای رقیق سازی پروتئین از حالتUnfold به حالت Refold در آمد. وزن مولکولی و غلظت پروتئینها با روشهای الکتروفورز و اسپکتروفتومتری اندازه گیری شد. Refoldingپروتئین با استفاده ازالکتروفرز با ژل Native و دستگاه Circular Dichroism) CD) بر اساس تغیرات ساختار دوم پروتئین ارزیابی شد. فعالیت ایمنی و ساختار ایمونوژنیسیته این دو پروتئین با استفاده از تست الایزا و وسترن بلات بر اساس نوع پروتئین و میزان جذب نوری (OD) ثبت شد.</p><p><strong>یافته ها:</strong> نتایج نشان داد که وزن مولکولی این دو پروتئین 32 کیلودالتون می باشد و از خلوص کامل برخوردارند.Refolding پروتئین از طریق ژل Native مشاهده شد. در این پروتئین افزایش ساختارهای Helix و Beta و کاهش ساختار Random (درمقایسه با پروتئین Unfold) پدیدارگردید. همچنین واکنش ایمنی در پروتئین استاندارد وRefold شده با آنتی بادهای موجود در سرم بیماران کنترل مثبت HIVمشاهده گردید و با استفاده از آنالیز واریانس یکطرفه اختلاف معنی داری بر حسب نوع پروتئین مشاهده نشد.</p><p><strong>نتیجه گیری:</strong> تحقیقات نشان داد که پروتئین نوترکیب gp41-p24 به دست آمده ازویروس HIV بعد از Refolding دارای فعالیت ایمونوژنی می باشد و از آن می توان به عنوان یک ایمونوژن در ایمونیزاسیون و تحریک سیستم ایمنی استفاده کرد. </p> <p><strong>Background:</strong> HIV recombinant proteins can be used as immunogen and inducer of immune system. The gag and env proteins are among the most important ones that are located on internal and surface sections, respectively. In this study, we considered the immunogenisity structure of HIV recombinant protein gp41-p24, which has not yet been studied in detail before.</p><p> <strong>Materials and Methods:</strong> In the present study, the HIV recombinant protein gp41-p24 was prepared by cloning methods and kept as unfolded. Using the dilution procedure, unfolded protein was changed to refolded state. The molecular weight and concentration of protein (refolded and unfolded) was measured by electrophoresis and spectrophotometer methods. The measurement of refolded protein can be estimated by native gel and circular dichroism method (CD) based on secondary structure of the protein. Immunological activity and immunogenic structure of these two proteins, based on protein type and optical density was recorded by ELISA and western blot methods. </p><p><strong>Results:</strong> Our results showed that molecular weight of each protein was 32 KD and also they were pure. The refolded protein was observed by native gel method. In the above protein compared with the unfolded one, increased content of helix and beta strand structures and decreased random form was shown. Immune reaction with the antibodies in the serum of HIV positive control patients was observed in the standard and refolded proteins. There was no significant difference based on the protein type.</p><p><strong> Conclusion:</strong> Our research indicated that the HIV recombinant protein gp41-p24, after refolding, has immunogenic activity and we suggest its application as an immunogen in immunization and stimulation of immune system. </p> پروتئین نوترکیب، ایمونوژنیسیته، Gp41،p24، ویروس HIV Recombinant protein gp41- p24, Unfold, Refold. 177 181 http://tmuj.iautmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-51&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Rouhpllah فاطمه روح اله panirohollah@yahoo.com 10031947532846001884 10031947532846001884 Yes Ghader Khalili قادر خلیلی 10031947532846001885 10031947532846001885 No Soroush Sardari سروش سرداری 10031947532846001886 10031947532846001886 No Masoumeh Tavassoti Kheiri معصومه توسطی خیری 10031947532846001887 10031947532846001887 No Aref Amirkhani عارف امیرخانی 10031947532846001888 10031947532846001888 No Taher Nejadsattari طاهر نژادستاری 10031947532846001889 10031947532846001889 No Fereidoun Mahboudi فریدون مهبودی 10031947532846001890 10031947532846001890 No