fa تشخیص سریع کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکولوزیس توسط تکنیک تکثیر هم‌دما به واسطه حلقه زيست شناسي مولكولي Molecular Biology تجربي Experimental <span style="font-weight: bold">سابقه و هدف</span>: تشخیص دقیق و سریع، یکی از مسائل مهم در کنترل بیماری سل می‌باشد. تکثیر هم دما به واسطه حلقه (LAMP)، تکنیکی ساده و سریع برای تکثیر اسید نوکلئیک است. در این مطالعه، به بررسی تکنیک LAMP پایه گذاری شده بر اساس توالی ژنی IS6110 در تشخیص مایکوباکتریوم توبرکولوزیس (MTB) پرداخته شد. <br><span style="font-weight: bold">روش بررسی</span>: تعداد 155 نمونه خلط از بیماران مشکوک به سل جمع‌آوری شد. 6 پرایمر اختصاصی برای تکنیک LAMP طراحی گردید و واکنش LAMP تحت شرایط بهینه انجام شد. حساسیت و ویژگی تکنیک LAMP جهت تشخیص کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکولوزیس مورد بررسی قرار گرفت. <br> <span style="font-weight: bold">یافته‌ها</span>: واکنش LAMP، در دمای 66 درجه سانتی‌گراد و مدت زمان 60 دقیقه با موفقیت انجام شد. محدودیت تشخیصی LAMP، fg 5 از DNA معادل یک کپی از ژنوم مایکوباکتریوم توبرکولوزیس بود. حساسیت و ویژگی این روش در نمونه های بالینی به ترتیب 100% و 9/95% محاسبه گردید. <br> <span style="font-weight: bold">نتیجه‌گیری</span>: تکنیک LAMP روشی سریع، حساس و کم هزینه برای تشخیص مایکوباکتریوم توبرکولوزیس می‌باشد که می‌توان از آن به طور روتین در مراکز تشخیص سل استفاده کرد. <span style="font-weight: bold">Background</span>: Rapid and efficient diagnosis is one of the crucial issues in the control of tuberculosis. Loop mediated isothermal amplification (LAMP) is a simple and rapid technique for nucleic acid amplification. In this study, we evaluate a LAMP assay targeting IS6110 gene for diagnosis of M. tuberculosis in clinical samples. <br><span style="font-weight: bold">Materials and Methods</span>: 155 clinical sputum specimens were collected from suspected patients with tuberculosis. Six specific primers were designed for LAMP assay. LAMP reaction was performed under optimal condition. Sensitivity and specificity of LAMP were determined. <br><span style="font-weight: bold">Results</span>: A successful LAMP reaction with newly designed primers was carried at 66ºC for 60 minutes. The detection limit of LAMP was 5fg DNA per tube. The sensitivity and specificity of this assay in clinical sputum samples were 100% and 95.9%, respectively. <br><span style="font-weight: bold">Conclusion</span>: LAMP is a rapid, sensitive and low cost technique that can be suitable for routine usage in diagnosis of TB. کمپلکس مایکوباکتریوم توبکولوزیس، تشخیص سریع، PCR، تکنیک LAMP Mycobacterium tuberculosis complex, Rapid detection, LAMP technique, PCR 137 142 http://tmuj.iautmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-155-51&slc_lang=fa&sid=1 Elham Kohan الهام کهن Kohan@iaua.ac.ir 10031947532846003493 10031947532846003493 Yes PhD Student of Cell and Molecular Biology, Department of Biology, Member of Scientific Board, Islamic Azad University, Arsanjan Branch, Arsanjan, Iran دانشجوی دکترای زیست شناسی سلولی و مولکولی، بخش زیست شناسی، عضو هیئت علمی دانشگاه آزاد اسلامی، واحد ارسنجان Mohammad Hassan Shahhosseiny محمدحسن شاه حسینی 10031947532846003494 10031947532846003494 No PhD of Biologic Products, Department of Microbiology, Islamic Azad University, Qods Branch, Tehran, Iran دکترای فراورده های بیولوژیک، بخش میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد شهر قدس Mohammad Rezd Razavi محمدرضا رضوی 10031947532846003495 10031947532846003495 No PhD of Molecular Biology, Department of Mycobacteriology, Pasteur Institute Of Iran, Tehran, Iran دکترای بیولوژی مولکولی، بخش تحقیقات ریوی، انستیتو پاستور ایران Kazem Parivar کاظم پریور 10031947532846003496 10031947532846003496 No PhD of Developmental Cellular Biology, Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Islamic Azad University, Science and Research Campus, Tehran, Iran دکترای زیست شناسی سلولی تکوینی، بخش زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران Elham Moslemi الهام مسلمی 10031947532846003497 10031947532846003497 No PhD of Cellular and Molecular Biology, Department of Biology, Islamic Azad University, Qiamdasht Branch, Qiamdasht, Iran دکترای زیست شناسی سلولی و مولکولی، بخش زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قیام دشت