|
استفاده از ویروس های نوترکیب مشتق از HIV-1 برای ترانسداکشن سلول های HT1080 با هدف ژن درمانی بیماران بتا - تالاسمی
|
مریم بی خوف تربتی   ، حسین خان احمد ، فاطمه جمشیدی ، مرتضی کریمی پور ، مجید صادقی زاده ، محمدعلی شکرگزار ، امیر امان زاده ، سیروس زینلی 1 |
| 1- ، sirouszeinali@yahoo.com |
|
|
چکیده: (33612 مشاهده) |
سابقه و هدف: یکی از روش های درمانی موثر برای بیماری بتاتالاسمی، ژن درمانی توسط ویرال وکتورها می باشد. هدف از این مطالعه ساخت لنتی ویروس های نوترکیب حاوی ژن بتاگلوبین و mini LCR جهت انتقال سازه ژنی مورد نظر به سلول های هدف به منظور ژن درمانی بتاتالاسمی ماژور می باشد.
روش بررسی: در این مطالعه بنیادی - کاربردی، هر یک از قطعات ژن بتاگلوبین و mini LCR در یک لنتی وکتور به نام pLenti-Destکلون شدند. طی ترانسفکشن هم زمان وکتور نهایی به همراه سه وکتور کمکی با لیپوفکتامین 2000 به درون رده سلولی 293T، لنتی ویروسهای نوترکیب حاوی سازه ژنی مورد نظر تولید و با RT PCR تایید شدند.
یافته ها: تیتر این لنتی ویروس های نوترکیب در رده سلولی HT1080 تعیین شد. ترانسداکشن سلول های هدف در حضور پلی برن 2 برابر شد. سلول های HT1080 ترانسدیوس شده پس از دو هفته انتخاب آنتی بیوتیکی باقی ماندند. DNA این کلونی های باقی مانده استخراج و با روش PCR اینتگره شدن سازه ژنی ساخته شده تایید شد. MOI اپتیمم این ویروس ها برای سلول HT1080 بدست آمد.
نتیجه گیری: می توان از لنتی ویرال وکتورها سبب انتقال موثر، کارآمد و پایدار ژن به سلول های پستانداران مانند سلول های بنیادی با هدف ژن درمانی بسیاری از بیماری های ژنتیکی از جمله بتاتالاسمی و سرطان استفاده کرد. |
|
| واژه‌های کلیدی: ژن درمانی، بتاتالاسمی، ژن بتاگلوبین، لنتی ویروس نوترکیب |
|
|
متن کامل [PDF 988 kb]
(6722 دریافت)
|
موضوع مقاله:
اپيدميولوژي
دریافت: 1385/6/15 | انتشار: 1388/7/23
|
|
|
|
|
|
