1- بخش تحقیق و توسعه، مجتمع تولیدی و تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران بخش سلولی و مولکولی، گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه اصفهان 2- بخش سلولی و مولکولی، گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه اصفهان 3- بخش تحقیق و توسعه، مجتمع تولیدی و تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران ، mohammadatyabi@yahoo.com 4- بخش پایلوت بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران 5- مرکز تحقیقات مهندسی زیست فناوری، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران
چکیده: (15195 مشاهده)
سابقه و هدف: توانایی کاهش مرگ سلولها ناشی از آپوپتوز و حفظ طولانیمدت بقاء آنها در محیطهای بدون سرم در کشت سلولی، موضوعات مهمی در تولید پروتئینهای نوترکیب میباشند. فاکتور رشد مشابه انسولین (I-IGF)، فاکتور رشد انتخابی جهت تکثیر سلولهای پستانداران در محیطهای کشت بدون سرم است که علاوه بر فعالیت میتوژنی، دارای فعالیت آنتیآپوپتوزی در برابر محرکهای القاءکننده مرگ میباشد. در این مطالعه، اثر آنتیآپوپتوزی غلظتهای متفاوت IGF-I طی زمانهای 24 و 48 ساعت بر روی رده سلولهای تخمدان هامستر K1 بررسی گردید.
روش بررسی: در این مطالعه تجربی، سلولها در محیط کشت DMEM حاوی آنتیبیوتیک به همراه ده درصد سرم جنین گاوی کشت داده شدند. آپوپتوز در سلولها توسط متوتروکسات القاء گردید، سرم حذف شد و در نهایت غلظتهای50-10 نانوگرم/میلیلیتر IGF-I اضافه گشت. فرایند آپوپتوز توسط کیت تشخیصی کاسپاز 3 و تکثیر سلولها با روش تعیین تکثیر و بقاء سلولی (MTT) مورد بررسی قرار گرفت.
یافتهها: با افزایش غلظتIGF-I ، فعالیت کاسپاز 3 کاهش معنیداری را نشان داد، به طوری که در بالاترین غلظت IGF-I (50 نانوگرم/ میلیلیتر) و با مقایسه با گروه کنترل منفی، پس از تیمار 24 و 48 ساعت به ترتیب 7/1 و 4/1 برابر کاهش فعالیت کاسپاز 3 مشاهده شد که موید فعالیت آنتیآپوپتوزی این فاکتور جهت حفظ بقاء سلولهای کشت داده شده در برابر محرکهای القایی آپوپتوز (متوتروکسات) میباشد. نتیجهگیری: IGF-I به عنوان فاکتور آنتیآپوپتوزی، مرگ برنامهریزی شده سلولهای CHO-K1 را در شرایط القایی آپوپتوزی کاهش داد.
Piroozmand S, Miroliaei M, atyabi S M, Kaghazian H, Moshtagheian J, Irani S et al . Effect of insulin–like growth factor-I on apoptosis in Chinese hamster ovary cells for biopharmaceutical production. MEDICAL SCIENCES 2013; 22 (4) :251-258 URL: http://tmuj.iautmu.ac.ir/article-1-619-fa.html
پیروزمند سمیه، میراولیایی مهران، اطیابی سیدمحمد، کاغذیان هومن، مشتاقیان جمال، ایرانی شیوا و همکاران.. اثر فاکتور رشد مشابه انسولین (IGF-I) در آپوپتوز سلولهای تخمدان هامستر چینی جهت تولید داروهای زیستی . فصلنامه علوم پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی تهران. 1391; 22 (4) :251-258