fa شناسایی جنسیت جنین انسان از طریق پلاسمای مادر باردار از هفته هشتم به بعد بوسیله Nested-PCR اپيدميولوژي Epidemiology <p><span style="font-weight: bold">سابقه و هدف</span>: تشخیص پیش از تولد(Prenatal Diagnosis) جنسیت جنین، نیازمند روش های تهاجمی نظیر نمونه گیری از طریق آمنیوسنتز و نمونه گیری از پرزهای کوریونی(CVS) می باشد. در سال های اخیر، یکی از روشهای غیر تهاجمی بررسی حضور DNA سلولهای هسته دار جنینی در پلاسمای خون مادر است که در این تحقیق مورد بررسی قرار گرفت.<br> <span style="font-weight: bold">روش بررسی</span>: در این مطالعه تجربی، سیستم Nested-PCR برای تشخیص ژن SRY جنینی با بکارگیری DNA جنینی از پلاسمای خون مادر باردار طراحی و بهینه سازی گردید. نمونه های خونی 32 زن باردار در هفته های 13-8 آبستنی جمع آوری و سپس DNA سلولها به روش فنل/کلرفرم استخراج گردید. در سیستم Nested-PCR، ژن SRY با دو جفت پرایمر طراحی شده تکثیر شد. حضور توالی های کروموزوم Y در پلاسمای خون مادر نشان دهنده جنسیت پسر جنین و در صورت فقدان آن نشان دهنده جنسیت دختر بود.<br> <span style="font-weight: bold">یافته ها</span>: از 32 زن باردار، پس از تکثیر ژن SRY به روش Nested-PCR، در 14مورد نتیجه مثبت بود، بطوری که در18 زن دارای جنین دختر نتایج مثبت دیده نشد و نتایج به دست آمده حساسیت 5/87 درصد را نشان داد.<br> <span style="font-weight: bold">نتیجه گیری</span>: روش استخراج فنل/کلرفرم یک روش ساده و موثر برای جداسازی DNA جنین از پلاسمای خون مادر می باشد و روش Nested-PCR روشی غیر تهاجمی ارزان و دردسترس برای برای تشخیص پیش از تولد می باشد .</p> <p><span style="font-weight: bold">Background</span>: Prenatal diagnosis of fetal sex is usually performed by invasive methods such as sampling through amniocentesis or chorionic villus sampling. One potential non-invasive approach involves analysis of cell-free fetal DNA in maternal plasma or serum. The objective of our study was to investigate the feasibility of using fetal DNA in maternal plasma for prenatal diagnosis of fetal sex.<br> <span style="font-weight: bold">Materials and Methods</span>: In this experimental study, a nested polymerase chain reaction (PCR) technique was developed for fetal SRY gene identification using cell-free fetal DNA in maternal plasma. Peripheral blood samples were obtained from 32 pregnant women at the gestational period from 8 to 13 weeks and cell-free DNA was extracted by the phenol/chloroform method from plasma. The nested PCR was carried out to amplify the fragment of SRY gene by two sets of PCR primer pairs. Analysis was then performed on the PCR product. Specifically, the presence of Y-chromosome sequences in maternal blood plasma indicates that the fetus is male, whereas lack of a signal will indicate that the fetus is female.<br> <span style="font-weight: bold">Results</span>: Among the 32 pregnant women, SRY sequences were detected in 14 plasma samples after nested PCR amplification, while the 18 women bearing female fetuses had the negative results. The sensitivity of this technique was 87.5%.<br> <span style="font-weight: bold">Conclusion</span>: The phenol/chloroform extraction of fetal DNA in maternal plasma is an effective and simple method, and the nested PCR amplification of SRY sequence is a convenient and low-cost approach for the non-invasive early prenatal diagnosis of fetal sex.</p> تشخیص پیش از تولد, DNA جنینی در پلاسمای مادر, Nested,PCR, ژن SRY Prenatal diagnosis, Fetal sex, nested PCR, SRY gene 1 6 http://tmuj.iautmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-123&slc_lang=fa&sid=1 Mehrdad Hashemi مهرداد هاشمی Hashemi_mehrdad@yahoo.com 10031947532846005516 10031947532846005516 Yes Ali Nazemi علی ناظمی 10031947532846005517 10031947532846005517 No Mahboubeh Safavi محبوبه صفوی 10031947532846005518 10031947532846005518 No Shahla Chaichian شهلا چایچیان 10031947532846005519 10031947532846005519 No Masoud Ghane مسعود قانع 10031947532846005520 10031947532846005520 No shahrashoob Sharifi شهرآشوب شریفی 10031947532846005521 10031947532846005521 No