fa جداسازی و شناسایی مولکولی یک Acinetobacter sp. مقاوم به آنتی‌بیوتیک از فاضلاب بیمارستانی و بررسی الگوی پلاسمیدی آن ميكروبيولوژي Microbiology تجربي Experimental <b>سابقه و هدف:</b> ظهور ژن‌های مقاوم به عوامل ضد میکروبی و استفاده بی‌رویه از آنتی‌بیوتیک‌ها منجر به انتشار باکتری‌های مقاوم به چند دارو در محیط می‌شود. هدف از این مطالعه، جداسازی و شناسایی مولکولی باکتری‌های مقاوم به آنتی‌بیوتیک از فاضلاب‌های بیمارستانی و بررسی نقش پلاسمید در ایجاد مقاومت بود. <br><b>روش بررسی:</b> در این مطالعه تجربی، مقاومت آنتی‌بیوتیکی سویه‌های جدا شده از فاضلاب بیمارستانی با روش دیسک دیفیوژن بررسی شد. شناسایی با روش برگی ((Bergey و مطالعات فیلوژنتیک بر مبنای توالی ژن 16S rRNA انجام شد. استخراج پلاسمید با روش لیز قلیایی و آزمایش کیورینگ پلاسمید (Plasmid curing) با اتیدیوم بروماید انجام شد. <br> <b>یافته‌ها:</b> 10 سویه از فاضلاب‌های بیمارستانی جدا شد. در تمام سویه‌ها مقاومت چند دارویی مشاهده گردید. یکی از سویه‌ها (ST1) نسبت به تمام آنتی‌بیوتیک های مورد آزمایش مقاوم بود. مطالعات فیلوژنتیک نشان داد که سویه ST1 متعلق به جنس Acinetobacter بوده و نزدیک‌ترین خویشاوند آن Acinetobacter baumanni IARI-V-4 است. سویه فوق Acinetobacter sp. HM_C نامیده شد و توالی نوکلئوتیدی آن در GenBank ثبت شد. تیمار سویه ST1 با اتیدیوم بروماید منجر به حذف پلاسمیدها و در نهایت از دست رفتن مقاومت به آمیکاسین و جنتامایسین شد. نتایج نشان داد که ژن‌های مقاومت به آمیکاسین و جنتامیسین در این سویه بر روی پلاسمید قرار دارند. <br> <b>نتیجه‌گیری:</b> فاضلاب بیمارستانی عاملی مهم در انتشار باکتری‌های مقاوم چند آنتی‌بیوتیکی و ژن‌های مقاومت است. <b>Background:</b> The emergence of antimicrobial-resistant genes and the indiscriminate use of antibiotics contribute to the dissemination of resistant pathogens in the environment. The objective of the present study was isolation and molecular identification of antibiotic resistant bacteria from the hospital sewage and investigation of the role of plasmid in resistance mechanism. <br><b>Materials and Methods:</b> In this experimental study, the antibiotic resistance patterns of the isolated strains from hospital effluent samples were assayed by disc diffusion method. The selected isolate was identified by morphological and biochemical methods in accordance with Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. Phylogenetic analysis was performed based on 16S rRNA gene sequences. Plasmid extraction was carried out by alkaline lysis technique and curing of plasmids performed by Ethidium bromide. <br><b>Results:</b> Ten bacterial strains were isolated from hospital sewage. Results of antibiotic susceptibility test showed that all of the isolates were multi-drug resistant. One of the isolates (ST1) was resistant to all of the tested antibiotics. Phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequences indicated that the isolate belongs to the genus Acinetobacter then designated as Acinetobacter sp. HM_C. Phylogenetically the closest relative of strain was Acinetobacter baumanni IARI-V-4. Curing experiments by Ethidium bromide caused the elimination of all plasmids. The sensitivity of the plasmid cured ST1 to gentamycin, and amikacin indicated that the genes encoding resistance to gentamycin, and amikacin were located on plasmid. <br><b>Conclusion:</b> Hospital effluents are important materials in dissemination of multidrug resistant bacteria and their resistant genes into the environment. مقاومت آنتی‌بیوتیکی، فاضلاب بیمارستانی، پلاسمید،sp. Acinetobacter. Antibiotic resistance, Hospital sewage, Plasmid, Acinetobacter sp. 127 133 http://tmuj.iautmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-155-98&slc_lang=fa&sid=1 Maryam Ghane مریم قانع ghane@iiau.ac.ir 10031947532846003875 10031947532846003875 Yes Department of Microbiology, Faculty of Basic Sciences, Islamic Azad University, Islamshahr Branch, Islamshahr, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد اسلامشهر Mojghan Bandeh pour مژگان بنده پور 10031947532846003876 10031947532846003876 No Department of Biotechnology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran بخش بیوتکنولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی