[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 30، شماره 4 - ( زمستان 1399 ) ::
جلد 30 شماره 4 صفحات 387-395 برگشت به فهرست نسخه ها
بررسی و مقایسه روش‌های مبتنی بر رسوب دهی و کروماتوگرافی تمایلی در تخلیص پروتئین نوترکیب استرپتوکیناز
مسعود سیدین خراسانی1 ، ملیحه کرامتی2 ، رضا آهنگری کهن3 ، فرزین روحوند4 ، داریوش نوروزیان 5
1- دانشجوی دکتری تخصصی بیوتکنولوژی دارویی، انستیتو پاستور ایران، بخش نانوبیوتکنولوژی، تهران، ایران
2- استادیار، دکتری تخصصی بیوتکنولوژی دارویی، انستیتو پاستور ایران، بخش نانوبیوتکنولوژی، تهران، ایران
3- دانشیار، دکتری تخصصی بیوتکنولوژی دارویی، انستیتو پاستور ایران، بخش نانوبیوتکنولوژی، تهران، ایران
4- دانشیار، دکتری تخصصی بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتو پاستور ایران، بخش ویروس شناسی، تهران، ایران
5- استاد، دکتری تخصصی بیوشیمی، انستیتو پاستور ایران، بخش نانوبیوتکنولوژی، تهران، ایران ، dnsa@pasteur.ac.ir
چکیده:   (357 مشاهده)
سابقه و هدف: تخلیص پروتئین با بازده و خلوص بالا چالشی جدی در تهیه پروتئین های نوترکیب دارویی است. از بین استراتژی­های تخلیص پروتئین هدف، روش­های تخلیص بر پایه کروماتوگرافی تمایلی مانند Ni-NTA بسیار پرکاربرد و در عین حال هزینه­بر هستند. روش­های تخلیص مستقل از ستون، مانند استفاده از پروتئین های شبیه به الاستین (ELP)، به عنوان روش­های جایگزین در حال توسعه هستند. در این تحقیق، کارایی استفاده از رزین نیکل، ELP و ترکیب آنها (ELP/Ni-NTA) در تخلیص پروتئین استرپتوکیناز مورد ارزیابی قرار گرفت.
روش بررسی: ژن استرپتوکیناز توسط PCR تکثیر، در پلازمیدpET21 کلون و به سلولE.coli-Rosetta  ترانسفرم شد. پروتئین آن بیان و تخلیص شد سپس ماهیت و خلوص پروتئین به ترتیب توسط وسترن بلات و SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت. بازده خالص سازی در هریک از روش های تخلیص با میکروبرادفورد محاسبه شد. 
یافته­ها: بازده خالص سازی ELP-SK-His با استفاده از ستون Ni-NTA به مقدار µg/ml 14±108 و ELP به مقدار µg/ml 16±76و ELP/Ni-NTA به مقدار µg/ml 11±88 محاسبه شد. نتایج رنگ آمیزی و وسترن بلات نشان داد که کیفیت خلوص پروتئین خالص شده با ELP/Ni-NTA بیشر از روش ELP و Ni-NTA به تنهایی بود.
نتیجه­گیری: مطالعه حاضر نشان داد که ادغام روش­های خالص سازی در یک مرحله می­تواند باعث افزایش خلوص و بازده محصول نهایی در تولید پروتئین­های نوترکیب دارویی شود.
واژه‌های کلیدی: پلی پپتیدهای شبیه الاستین، تخلیص پروتئین، استرپتوکیناز، تخلیص مستقل از ستون
متن کامل [PDF 462 kb]   (223 دریافت)    
نيمه آزمايشي : تجربي | موضوع مقاله: بيوتكنولوژي
دریافت: 1398/6/10 | پذیرش: 1398/11/7 | انتشار: 1399/9/30
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Seyedinkhorasani M, Keramati M, Ahangari Cohan R, Roohvand F, Norouzian D. Evaluation and comparison of affinity chromatography and precipitation– based methods on purification of recombinant streptokinase. MEDICAL SCIENCES. 2020; 30 (4) :387-395
URL: http://tmuj.iautmu.ac.ir/article-1-1841-fa.html

سیدین خراسانی مسعود، کرامتی ملیحه، آهنگری کهن رضا، روحوند فرزین، نوروزیان داریوش. بررسی و مقایسه روش‌های مبتنی بر رسوب دهی و کروماتوگرافی تمایلی در تخلیص پروتئین نوترکیب استرپتوکیناز. فصلنامه علوم پزشکی . 1399; 30 (4) :387-395

URL: http://tmuj.iautmu.ac.ir/article-1-1841-fa.html



دوره 30، شماره 4 - ( زمستان 1399 ) برگشت به فهرست نسخه ها
فصلنامه علوم پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد پزشکی تهران Medical Science Journal of Islamic Azad Univesity - Tehran Medical Branch
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 29 queries by YEKTAWEB 4280