[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 31، شماره 1 - ( بهار1400 1399 ) ::
جلد 31 شماره 1 صفحات 70-78 برگشت به فهرست نسخه ها
دستکاری ژنتیکی سلولهای بنیادی مزانشیمی انسانی مشتق از چربی با miR-34a
کتایون بهمن صوفیانی1 ، دکتر علی اکبر پورفتح اله 2، دکتر مهین نیکو گفتار ظریف3، دکتر احسان عارفیان4
1- دانشجوی دکتری دانشگاه تربیت مدرس، گروه ایمنی شناسی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
2- استاد دانشگاه تربیت مدرس، گروه ایمنی شناسی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران ، pourfa@modares.ac.ir
3- دانشیار سازمان انتقال خون ایران، گروه هماتولوری، موسسه آموزش عالی سازمان انتقال خون ایران، تهران، ایران
4- استادیار دانشگاه تهران، گروه میکروبشناسی، پردیس علوم پایه، دانشکده زیست شناسی، دانشگاه تهران، تهران، ایران
چکیده:   (115 مشاهده)
سابقه و هدف: ژن تراپی ایمن و موثر به عنوان یکی از اهداف درمانی در بسیاری از بیماری­ها در نظر گرفته می­شود. با توجه به نقش مهم سلول­های بنیادی در سل تراپی، این مطالعه با هدف تولید سلول­های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی انسان (hASC) با افزایش بیان miR-34a انجام شد.
روش بررسی: توالی پیش ساز hsa-mir-34a  در وکتورPCDH  لنتی ویروس کلون شد. وکتور نوترکیب و دو وکتور کمکی یعنی psPAX و pMD2  با روش کلسیم فسفات به داخل HEK-293T  منتقل شدند. سوپ ویروسی جمع آوری و با اولترا سانتریفیوژ  تغلیظ شد. سلول­هایHEK-293T ترانسدیوس شده در روز چهارم با فلوسایتومتری ارزیابی شدند. پس از تعیین غلظت ویروسی، سلول­های hASC با ویروس­های تغلیظ شده ترانسدیوس شدند. استخراج RNA و سنتز cDNA به منظور ارزیابی میزان بیان miR-34a با Real Time PCR انجام شد.   
یافته ­ها: توالی پیش ساز hsa-mir-34a   کلون شده در وکتور PCDH با colony-PCR و DNA sequencing تائید شد. ترانسداکشن سلول­های HEK-293T و hASC  در زیر میکروسکوپ معکوس فلورسنت دار و فلوسایتومتری مورد تائید قرار گرفتند. ارزیابی میزان بیان miR-34a در سلول­های آلوده به ویروس نوترکیب نشان داد که نسبت بیان miR-34a در گروه تست به طور معنی­داری بیشتر از گروه کنترل بود (001/0=P).
نتیجه­ گیری: این مطالعه نشان دادکه از سیستم­های لنتی­ویروس­ها می­توان برای وارد کردن ژن­های خارجی نظیر miR-34a  به سلول­ها استفاده کرد. همچنین این مطالعه نشان داد که سلول­های بنیادی دستکاری شده ژنتیکی به عنوان delivery system برای انتقال miR-34a و یا هر ژن دیگری می­توانند استفاده شوند.
واژه‌های کلیدی: سلولهای بنیادی، لنتی ویروس، ترنسداکشن، ترنسفکشن، HEK-293T، miR-34a
متن کامل [PDF 633 kb]   (48 دریافت)    
نيمه آزمايشي : بنيادي | موضوع مقاله: زيست شناسي مولكولي
دریافت: 1399/2/22 | پذیرش: 1399/6/15 | انتشار: 1400/1/4
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Bahman Soufiani K, Pourfathollah A A, Nikougoftar Zarif M, Arefian E. Gene manipulation of human adipose-derived mesenchymal stem cells by miR-34a. MEDICAL SCIENCES. 2021; 31 (1) :70-78
URL: http://tmuj.iautmu.ac.ir/article-1-1726-fa.html

بهمن صوفیانی کتایون، پورفتح اله علی اکبر، نیکو گفتار ظریف مهین، عارفیان احسان. دستکاری ژنتیکی سلولهای بنیادی مزانشیمی انسانی مشتق از چربی با miR-34a. فصلنامه علوم پزشکی . 1399; 31 (1) :70-78

URL: http://tmuj.iautmu.ac.ir/article-1-1726-fa.html



دوره 31، شماره 1 - ( بهار1400 1399 ) برگشت به فهرست نسخه ها
فصلنامه علوم پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد پزشکی تهران Medical Science Journal of Islamic Azad Univesity - Tehran Medical Branch
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 30 queries by YEKTAWEB 4280